产品货号:
JN5066
中文名称:
2×PCR Mix(UDG酶,含染料)
英文名称:
2×Depolluting PCR Mix(Quick Load)
产品规格:
1mL|5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品采取PCR Mix预混形式,并整合了UDG/dUTP防污染系统,将PCR反应所需的酶与防污染所用的UDG酶及dNTPs(含dUTP)、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物,对反应体系进行优化,使得两种酶都能发挥最大功效,并且在含有dUTP的情况下不影响Taq DNA聚合酶扩增的灵敏度,大大地简化了操作过程并能够有效消除污染的扩增产物对检测结果的干扰。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
常用于易出现二次PCR污染的检测实验。
- 快捷:PCR反应所需试剂集于一管之中,减少了操作步骤,降低污染。
- 灵敏:优化试剂配方,灵敏度高。
组分 | 1mL | 5mL |
2×PCR Mix(UDG酶,含染料) | 1mL | 5mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留;qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
防污染PCR扩增检测试剂盒专为PCR扩增检测反应优化,使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,由于采用UDG/dUTP防污染系统,有效的减少了PCR操作过程中的污染。
- 在操作过程中,我们需要对实验室进行分区。
- 实验室必须在所有的PCR反应中使用防污染PCR扩增检测试剂,这样才能完全消除污染。如果只使用于某个检测,系统难以完全起作用。
- 如果采取各种措施后,PCR污染仍不能消除时,我们需要重新设计引物,避免原来的扩增产物污染。
1.常用反应体系
成分 | 用量 |
2×PCR Mix(UDG酶,含染料) | 25μL |
上游引物 | 0.2~1.0μM(终浓度) |
下游引物 | 0.2~1.0μM(终浓度) |
模板 | 1~50ng(质粒) 10ng~1μg(基因组) |
ddH2O | 至50μL |
2.推荐PCR反应程序
循环数 | 温度 | 时间 |
1 | 50℃ | 2min |
1 | 94℃ | 5min(灭活UDG酶,模板变性) |
30 | 94℃ | 20s |
50~60℃ | 20s | |
72℃ | 1kb/60s | |
1 | 72℃ | 5min |
1 | 4℃ | 保温 |
普通2×Taq MasterMix扩增体系和2×PCR Mix(UDG酶,含染料)对(500bp)污染模板的阻止效果,且对于正常模板(250bp)的PCR扩增反应的影响性。
泳道1,2:2×Taq Master Mix扩增;
泳道3,4:防污染PCR扩增检测系统;
泳道M:DNA Ladder 2000。
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